ELISA試劑盒標準曲線是結(jié)果計算的尺子,標準品是ELISA 實驗成功與否的關鍵點。怎樣正確溶解、稀釋標準品呢?
1. 粉末標準品短暫離心,讓因運輸沾到管蓋、管壁的標準品沉到管底。
2. 根據(jù)瓶標簽加入一定體積的蒸餾水,加水后輕柔渦旋震蕩,室溫靜置溶解 10-30min,讓粉末溶解。 注意:加水后暫不用移液槍吹吸,避免蛋白未溶解,槍頭帶出部分蛋白,待溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。
標準品梯度稀釋:
1. 標準品稀釋液的選擇:若血清、血漿、組織勻漿樣本,用試劑盒中的標準品稀釋液,梯度稀釋標準品。
若細胞上清樣本,建議用細胞培養(yǎng)基梯度稀釋標準品。
2. 耗材準備:準備8個1.5Ml離心管,寫上S1-S7、空白。
3. 梯度稀釋:根據(jù)說明書,每管加入等體積的標準品稀釋液(培養(yǎng)基)。吸取同體積溶解好的標準品到S1管中,吹打10次混勻,渦旋5S。從S1管中吸取同體積溶液到 S2管,吹打10次混勻,渦旋5s。同法稀釋S3-S7濃度。
4. 空白: 標準品稀釋液(培養(yǎng)基)作為空白即零濃度。
注意:梯度稀釋標準品時,渦旋震蕩混勻后可短暫離心,讓到蓋子、壁上的液體到管底,再開始稀釋下個濃度。
標準品溶解、梯度稀釋是ELISA實驗關鍵點,按以上方法梯度稀釋就可,以下是我們的ELISA試劑盒標準操作視頻,可供大家參考。
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