ELISA試劑盒總需求時刻來保溫,是因為ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被的夾心法為例,參加板孔中的標本,其間的抗原并不是都有對等的和固相抗結合的機會,只需zui靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的進程,因而需經松散才華抵達反響的完畢。
保溫的辦法除有的ELISA試劑盒儀器附有特制的電熱塊外,一般均選用水浴,可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中,ELISA板底應貼著水面,使溫度活絡平衡。為避免蒸騰,板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此刻可讓反響板漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA試劑盒應放在濕盒內,濕盒要選用傳熱性超卓的資料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui終將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規(guī)則的溫度,特別是在氣溫較低的時分更應如此。
在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響,即加標本和加酶結合物后??乖贵w反響的完畢需求有必定的溫度和時刻,這一保溫進程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA試劑盒中似不恰當。
無論是水浴仍是濕盒溫育,反響板均不宜疊放,以確保各板的溫度都能活絡平衡。室溫溫育的反響,操作時的室溫應嚴峻束縛在規(guī)則的范圍內,規(guī)范室溫溫度是指20~25℃,但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。室溫溫育時,ELISA試劑盒只需平置于操作臺上即可。應留神溫育的溫度和時刻應按規(guī)則力求準確。為確保這一點,一個人操作時,一次不宜多于兩塊板一同測定。