SNU182肝癌細(xì)胞培養(yǎng)方法

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防護(hù)措施提示：

手 防 護(hù)  ：  戴防化學(xué)品手套。

眼睛防護(hù) ： 戴安全防護(hù)眼鏡。

身體防護(hù) ： 穿防毒物滲透工作服。

呼吸防護(hù) ： 空氣中濃度超標(biāo)時(shí)，應(yīng)該佩戴直接式防毒面具(半面罩)。

接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：

1、貼壁細(xì)胞生長緩慢，適當(dāng)提高血清濃度（不能超過20%），或可根據(jù)該細(xì)胞生長特性生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)

2、如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天，3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決

3、生長不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

傳代方法：細(xì)胞*匯合時(shí)，倒掉舊液，加入消化液（0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA）2ml消化，顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)細(xì)胞后棄掉胰酶，加培養(yǎng)基混勻分瓶，T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml，T75瓶加培養(yǎng)基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培養(yǎng)。

培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究zui常用的手段之一，可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。由于細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來，故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段，同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。

購買流程：

1.客戶確定訂購

2.公司將合同發(fā)給客戶簽字（電子版或者紙質(zhì)版），同時(shí)快遞發(fā)給客戶

3.由客戶報(bào)銷費(fèi)用到公司賬戶

4.報(bào)賬過程中，我公司將復(fù)蘇細(xì)胞，做QC

5. QC通過，同時(shí)費(fèi)用到賬，即可發(fā)貨給客戶（順豐）

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