更新時間:2024-06-10
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培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防細胞支原體的污染:
A. 控制環(huán)境污染
B. 嚴格實驗操作
C. 細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌
D. 在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素
E. 避免細胞污染,可以從預防著手,超凈工作臺物品放置要合理、進入細胞房要換鞋和穿實驗服、實驗員戴手套后要用酒精等消毒、避免細胞交叉污染等等
傳代方法:細胞*匯合時,倒掉舊液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉胰酶,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)是生物學和醫(yī)學研究zui常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細胞進行培養(yǎng)。由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。
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細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
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訂購須知:
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B. 包裝規(guī)格:液體包裝,如有特殊需求,我們根據(jù)客戶要求包裝
C. 運輸方式:默認順豐快遞,大宗貨物走德邦物流
D. 質(zhì)量保證:嚴格的質(zhì)量控制,通過全面的檢測,是產(chǎn)品質(zhì)量保證的基礎
E. 產(chǎn)品儲存:收到產(chǎn)品后需放置在陰涼處或冷藏,切記放置在高溫處
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